Práctica # 9 prueba de aglutinación en sangre
Examen realizado tipo sanguíneo
El alumno debe realizar la prueba de aglutinación en sangre fresca para poder llegar al análisis de tipos sanguíneos.
Materiales
1.-placa escavada de porcelana
2.-pallillos de madera
3.-tubo de ensaye de tapón morado con anticoagulante
4.- torniquete
5.-jeringa hipodérmica desechable 5ml
6.- torundas de algodón alcoholizadas
7.-torundas de algodón secas
8.-gradilla
9.-reactivo pipificadores es anti a, b y d
Desarrollo
TECNICA DE VENOPUNCION
Se extrae la sangre del pliegue del brazo en un volumen de 2.5 ml para trasvasar tubo con tapón morado que contiene anticoagulante. Una vez que se tiene la sangre fresca se puntea en la placa escavada utilizando una pipeta Pasteur con bulbo
jueves, 18 de junio de 2009
sábado, 30 de mayo de 2009
practica 8
Practica 8
Prueba de aglutinación en suero sanguíneo
Examen de laboratorio reacciones febriles
El alumno de laboratorio de análisis clínicos y sangre fresca, utilizando los instrumentos de laboratorio equipo científico y reactivos para alcanzar su objetivo reacciones febriles, dándonos la oportunidad de poder investigar microorganismos bacteriológicos pertenecemos al grupo de enteró bacterias donde encontraremos, salmonella, brucella, proteos.
Materiales
1.-lamina de cristal para reacciones febriles
2.-tubo de ensaye tapón rojo
3.-palito de madera
4.-torundas de algodón secas
5.-centrifuga.
6.-microscopio
7.-reactivo febriclin
8.-jeringa equipo térmica desechable
9.-torniquete
10.-torundas de algodón alcoholizadas
11.-masking tape
12.-pipeta pastear
14.-bulbo
Nota: utilizar técnica de venofuncion para la extracción de sangre fresca donde se obtenga por medio de centrifuga por medio paquete sanguíneo (sangre) y uno plasmático.
En esta prueba se debe de aplicar la cerologia ya que ocuparemos los típicos H y O
Típicos A y B brucella abortus y proteos 019.
Es exclusivamente de aglutinación por lo que se debe observar bajo luz macroscopica en el microscopio a 10x de forma macroscopica.
Desarrollo
Presentando se utiliza la técnica de venofuncion para la sangre fresca el volumen dé 2.5 ml una vez obtenida la sangre se deposita
Prueba de aglutinación en suero sanguíneo
Examen de laboratorio reacciones febriles
El alumno de laboratorio de análisis clínicos y sangre fresca, utilizando los instrumentos de laboratorio equipo científico y reactivos para alcanzar su objetivo reacciones febriles, dándonos la oportunidad de poder investigar microorganismos bacteriológicos pertenecemos al grupo de enteró bacterias donde encontraremos, salmonella, brucella, proteos.
Materiales
1.-lamina de cristal para reacciones febriles
2.-tubo de ensaye tapón rojo
3.-palito de madera
4.-torundas de algodón secas
5.-centrifuga.
6.-microscopio
7.-reactivo febriclin
8.-jeringa equipo térmica desechable
9.-torniquete
10.-torundas de algodón alcoholizadas
11.-masking tape
12.-pipeta pastear
14.-bulbo
Nota: utilizar técnica de venofuncion para la extracción de sangre fresca donde se obtenga por medio de centrifuga por medio paquete sanguíneo (sangre) y uno plasmático.
En esta prueba se debe de aplicar la cerologia ya que ocuparemos los típicos H y O
Típicos A y B brucella abortus y proteos 019.
Es exclusivamente de aglutinación por lo que se debe observar bajo luz macroscopica en el microscopio a 10x de forma macroscopica.
Desarrollo
Presentando se utiliza la técnica de venofuncion para la sangre fresca el volumen dé 2.5 ml una vez obtenida la sangre se deposita
sábado, 23 de mayo de 2009
salmonelosis,tifoidea, paratifoidea, proteus, brucella
salmonelosis
contituye un grupo producidas por microorganismos del genero salmonella, adquiridas por la ingestion de alimentos o bebidas contaminadas y caracteriza por presentar sindormes febriles asociados a manifestaciones gastrointestinales o sistematicos, confrecuencia severas.
sintomas
-diarrea leve o persistente
-fiebre alta
-nauseas vomito en algunos casos
-dolor abdominal
-malestar general
tifoidea y paratifoidea
la fiebre tifoidea es una enfermadad infecciosas que es causada por la salmonella typhi. es una enfermdad enteramente diferente que no debe ser confundida con la enfermedad causada por la salmonella typhi murium o salmonella paratyphi.
cuales son los sintomas
personas con esta enfermdad pueden experimentar sintomas severos o leves. los sintomas de la fiebre tifoidea pueden incluir fiebre, dolor de cabeza,molestias generales, perdida de apetito,y una tos seca. latidos del corazo se hacen lentos y el brazo aunmenta personas no tienen sintomas.
proteus
comprende un grupo de bacterias que normalmente se encuentran en l atierr , el agua y las heces.tambien pueden causar infecciones profundas, en particular dentro de la cavidad abdominal, las vias y la vejiga.
es un agente infeccioso de origen bacteriolgico: que causa dolores de cabeza, estomago, diarrea y otros malestares.
es un agente bacteriano: que se presenta por contaminaion de laiemntos y afecta ala poblacion infantil.
brucella
es un modelo de parasito intracelular, una categoria que incluye otras bacterias importantes, como las de la tuberculosis o la legionelosis, la brucella penetra en los macrofagos dentro de vesiculas membranas, que son funsionadas con los lisomas (estructurales que contienen los productos celulares necesariamente para destruir bacterias) como ocurre con otros microorganismos.
sintomas de la brucella
causa gripe con fiebre, calorfrio, dolor de cabeza, dolor de cuerpo, y debilidad, la fiebre puede subir y bajar durante las 24 hrs.
tambien la perdida de peso, perdida de apetito y fatiga prolongada.
contituye un grupo producidas por microorganismos del genero salmonella, adquiridas por la ingestion de alimentos o bebidas contaminadas y caracteriza por presentar sindormes febriles asociados a manifestaciones gastrointestinales o sistematicos, confrecuencia severas.
sintomas
-diarrea leve o persistente
-fiebre alta
-nauseas vomito en algunos casos
-dolor abdominal
-malestar general
tifoidea y paratifoidea
la fiebre tifoidea es una enfermadad infecciosas que es causada por la salmonella typhi. es una enfermdad enteramente diferente que no debe ser confundida con la enfermedad causada por la salmonella typhi murium o salmonella paratyphi.
cuales son los sintomas
personas con esta enfermdad pueden experimentar sintomas severos o leves. los sintomas de la fiebre tifoidea pueden incluir fiebre, dolor de cabeza,molestias generales, perdida de apetito,y una tos seca. latidos del corazo se hacen lentos y el brazo aunmenta personas no tienen sintomas.
proteus
comprende un grupo de bacterias que normalmente se encuentran en l atierr , el agua y las heces.tambien pueden causar infecciones profundas, en particular dentro de la cavidad abdominal, las vias y la vejiga.
es un agente infeccioso de origen bacteriolgico: que causa dolores de cabeza, estomago, diarrea y otros malestares.
es un agente bacteriano: que se presenta por contaminaion de laiemntos y afecta ala poblacion infantil.
brucella
es un modelo de parasito intracelular, una categoria que incluye otras bacterias importantes, como las de la tuberculosis o la legionelosis, la brucella penetra en los macrofagos dentro de vesiculas membranas, que son funsionadas con los lisomas (estructurales que contienen los productos celulares necesariamente para destruir bacterias) como ocurre con otros microorganismos.
sintomas de la brucella
causa gripe con fiebre, calorfrio, dolor de cabeza, dolor de cuerpo, y debilidad, la fiebre puede subir y bajar durante las 24 hrs.
tambien la perdida de peso, perdida de apetito y fatiga prolongada.
viernes, 22 de mayo de 2009
TAREA #7
COCOS
Los cocos piógenos (productoras de pus) son bacterias esféricas que causan diferentes infecciones supurativas Incluye a cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes y Streptococcus pneumoniae, y a los cocos Gram-negativas Neisseria gonorrhoeae y N. meningitidis. Estas bacterias son patogenas y se estima que producen un tercio de las infecciones humanas, entre ellas infecciones en la garganta, neumonía, enfermedades de la piel, shock septicémicos, meningitis, gonorrea, envenenamiento de alimentos. Staphylococcus aureus es una de las bacterias mas exitosas con un amplio rango de virulencia lo que le permite ser el agente de un amplio número de infecciones y a menudo esta presente en la flora normal humana (piel, mucosa nasal y tracto genital ), esto asegura su transmisibilidad de un individuo a otro.En términos de filogenia fisiología y genética, estos géneros de bacterias están poco relacionados entre ellos. Sin embargo comparten una ecología común, como patógenos humanos. El pus es el resultante de la batalla entre los fagocitos (neutrófilos) y las bacterias invasoras. A medida que las bacterias son ingeridas y muertas por los fagocitos los mismos eventualmente se lisan y liberan su contenido que, junto a los productos de digestión de las bacterias, constituyen el principal material del pus. Por otra parte como una defensa contra los fagocitos los estrepto y estafilococos producen toxinas que matan los neutrófilos antes de que ingieran las bacterias contribuyendo al aumento del pus. Dos especies de Staphylococcus viven asociadas a los humanos: Staphylococcus epidermidis habitante normal de la piel y membranas mucosas y Staphylococcus aureus con una localización variada, aunque generalmente se lo encuentra en mucosa nasal. S. epidermidis raramente es patógeno y probablemente beneficia a su huésped produciendo ácidos y retardando de este modo el crecimiento de hongos dermatofitos. S. aureus siempre posee el potencial de causar enfermedades y por lo tanto se lo considera patógeno. Diferentes cepas de S. aureus difieren en el rango de enfermedades que causan incluyéndose entre ellas forúnculos y granos, infecciones de heridas, neumonía, osteomielitis, septicemia, intoxicación alimentaria, y shock tóxico. S. aureus encabeza el ranking de productores de infecciones intrahospitalarias entre las bacterias Gram-positivas. También es notoria su resistencia a la penicilina y otros antibióticos. Streptococcus pyogenes, más especificamente Streptococos del grupo A beta hemolíticos, al igual que S. aureus, son la causa de un conjunto de enfermedades supurativas y toxigénicas y para completar algunas enfermedades autoinmunes y alérgicas. S. pyogenes raramente se encuentra como flora normal (<1%), causa amigdalitis e infecciones de la garganta. Los estreptococos también invaden la piel causando infecciones localizadas y lesiones producen toxinas que causan la escarlatina y el shock tóxico. Algunas veces como resultado de una infección estreptocócica aguda se produce una respuesta inmune anómala que lleva a enfermedades como la fiebre reumática y la glomérulo nefritis (las así llamadas secuelas post-estreptococcicas). A diferencia de los estafilococos no han desarrollado una resistencia generalizada a la penicilina y a los antibióticos beta lactámicos, por lo tanto los beta lactámicos SON LA DROGA DE ELECCIÓN para el tratamiento de las enfermedades estreptocócicas agudas. Streptococcus pneumoniae es la causa mas frecuente de neumonía en humanos. También es causa frecuente de otitis media y meningitis. Las bacterias colonizan la nasofaringe y desde allí acceden a pulmones o trompa de Eustaquio. Aquellas que poseen cápsulas pueden impedir la fagocitosis por los macrófagos alveolares por lo tanto las cepas capsuladas pueden invadir los pulmones y son VIRULENTAS mientras que las no capsuladas que son rápidamente fagocitadas son no virulentas.
BACILOS
El género Bacillus está compuesto por bacilos grampositivos grandes caracterizados por su capacidad para producir endosporas. El género incluye microorganismos aerobios estrictos y anaerobios facultativos. Bacillus anthracis es causante de enfermedad en el ser humano. Muchas otras especies están distribuidas en la naturaleza y se hallan en la mayor parte de las muestras de suelos, agua y polvo. Ciertos miembros de dicho género han adquirido importancia como productores de antibióticos. (1)Bacillus anthracis.El carbunco (enfermedad de los animales herbívoros, ovinos y bovinos, equinos, porcinos y caprinos) es causado por el B. anthacis, un bacilo grampositivo aerobio y formador de esporas. Es un bacilo recto que mide de 3 a 5 micras de largo y de 1 a 1.2 micras de ancho, es inmóvil. Están encapsulados durante la proliferación en el animal infectado.Características de su cultivo. Proliferan bien en placas con agar sangre. La proliferación máxima se obtiene con un pH de 7-7.4 en condiciones aerobias, pero se produce desarrollo en ausencia de oxígeno. Identificación de laboratorio. Ni los aspectos morfológicos ni las características de cultivo habituales permiten diferenciar al B. anthracis de las cepas inmóviles de B. cereus, el microorganismo con el que más fácilmente se confunde.Sin embargo, las cepas virulentas de B. anthracis son los únicos microorganismos que producen colonias rugosas cuando proliferan en ausencia de un mayor nivel de CO2 y colonias mucoides cuando proliferan en un medio con bicarbonato de sodio en una atmósfera con un 5% de CO2. Losseres humanos se infectan de una de tres formas:1. La vía cutánea. Los microorganismos acceden a través de pequeñas abrasiones o cortes y se multiplican.2. Inhalación. Los microorganismos son inhalados, se multiplican en los pulmones y son barridos hacia los ganglios linfáticos hiliares de drenaje, donde se rpoduce una necrosis hemorrágica.3. Ingestión. Rara vez los microorganismos son ingeridos en carne infectada, con ella resultante invasión y ulceración de la mucosa gastrointestinal.
Los cocos piógenos (productoras de pus) son bacterias esféricas que causan diferentes infecciones supurativas Incluye a cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes y Streptococcus pneumoniae, y a los cocos Gram-negativas Neisseria gonorrhoeae y N. meningitidis. Estas bacterias son patogenas y se estima que producen un tercio de las infecciones humanas, entre ellas infecciones en la garganta, neumonía, enfermedades de la piel, shock septicémicos, meningitis, gonorrea, envenenamiento de alimentos. Staphylococcus aureus es una de las bacterias mas exitosas con un amplio rango de virulencia lo que le permite ser el agente de un amplio número de infecciones y a menudo esta presente en la flora normal humana (piel, mucosa nasal y tracto genital ), esto asegura su transmisibilidad de un individuo a otro.En términos de filogenia fisiología y genética, estos géneros de bacterias están poco relacionados entre ellos. Sin embargo comparten una ecología común, como patógenos humanos. El pus es el resultante de la batalla entre los fagocitos (neutrófilos) y las bacterias invasoras. A medida que las bacterias son ingeridas y muertas por los fagocitos los mismos eventualmente se lisan y liberan su contenido que, junto a los productos de digestión de las bacterias, constituyen el principal material del pus. Por otra parte como una defensa contra los fagocitos los estrepto y estafilococos producen toxinas que matan los neutrófilos antes de que ingieran las bacterias contribuyendo al aumento del pus. Dos especies de Staphylococcus viven asociadas a los humanos: Staphylococcus epidermidis habitante normal de la piel y membranas mucosas y Staphylococcus aureus con una localización variada, aunque generalmente se lo encuentra en mucosa nasal. S. epidermidis raramente es patógeno y probablemente beneficia a su huésped produciendo ácidos y retardando de este modo el crecimiento de hongos dermatofitos. S. aureus siempre posee el potencial de causar enfermedades y por lo tanto se lo considera patógeno. Diferentes cepas de S. aureus difieren en el rango de enfermedades que causan incluyéndose entre ellas forúnculos y granos, infecciones de heridas, neumonía, osteomielitis, septicemia, intoxicación alimentaria, y shock tóxico. S. aureus encabeza el ranking de productores de infecciones intrahospitalarias entre las bacterias Gram-positivas. También es notoria su resistencia a la penicilina y otros antibióticos. Streptococcus pyogenes, más especificamente Streptococos del grupo A beta hemolíticos, al igual que S. aureus, son la causa de un conjunto de enfermedades supurativas y toxigénicas y para completar algunas enfermedades autoinmunes y alérgicas. S. pyogenes raramente se encuentra como flora normal (<1%), causa amigdalitis e infecciones de la garganta. Los estreptococos también invaden la piel causando infecciones localizadas y lesiones producen toxinas que causan la escarlatina y el shock tóxico. Algunas veces como resultado de una infección estreptocócica aguda se produce una respuesta inmune anómala que lleva a enfermedades como la fiebre reumática y la glomérulo nefritis (las así llamadas secuelas post-estreptococcicas). A diferencia de los estafilococos no han desarrollado una resistencia generalizada a la penicilina y a los antibióticos beta lactámicos, por lo tanto los beta lactámicos SON LA DROGA DE ELECCIÓN para el tratamiento de las enfermedades estreptocócicas agudas. Streptococcus pneumoniae es la causa mas frecuente de neumonía en humanos. También es causa frecuente de otitis media y meningitis. Las bacterias colonizan la nasofaringe y desde allí acceden a pulmones o trompa de Eustaquio. Aquellas que poseen cápsulas pueden impedir la fagocitosis por los macrófagos alveolares por lo tanto las cepas capsuladas pueden invadir los pulmones y son VIRULENTAS mientras que las no capsuladas que son rápidamente fagocitadas son no virulentas.
BACILOS
El género Bacillus está compuesto por bacilos grampositivos grandes caracterizados por su capacidad para producir endosporas. El género incluye microorganismos aerobios estrictos y anaerobios facultativos. Bacillus anthracis es causante de enfermedad en el ser humano. Muchas otras especies están distribuidas en la naturaleza y se hallan en la mayor parte de las muestras de suelos, agua y polvo. Ciertos miembros de dicho género han adquirido importancia como productores de antibióticos. (1)Bacillus anthracis.El carbunco (enfermedad de los animales herbívoros, ovinos y bovinos, equinos, porcinos y caprinos) es causado por el B. anthacis, un bacilo grampositivo aerobio y formador de esporas. Es un bacilo recto que mide de 3 a 5 micras de largo y de 1 a 1.2 micras de ancho, es inmóvil. Están encapsulados durante la proliferación en el animal infectado.Características de su cultivo. Proliferan bien en placas con agar sangre. La proliferación máxima se obtiene con un pH de 7-7.4 en condiciones aerobias, pero se produce desarrollo en ausencia de oxígeno. Identificación de laboratorio. Ni los aspectos morfológicos ni las características de cultivo habituales permiten diferenciar al B. anthracis de las cepas inmóviles de B. cereus, el microorganismo con el que más fácilmente se confunde.Sin embargo, las cepas virulentas de B. anthracis son los únicos microorganismos que producen colonias rugosas cuando proliferan en ausencia de un mayor nivel de CO2 y colonias mucoides cuando proliferan en un medio con bicarbonato de sodio en una atmósfera con un 5% de CO2. Losseres humanos se infectan de una de tres formas:1. La vía cutánea. Los microorganismos acceden a través de pequeñas abrasiones o cortes y se multiplican.2. Inhalación. Los microorganismos son inhalados, se multiplican en los pulmones y son barridos hacia los ganglios linfáticos hiliares de drenaje, donde se rpoduce una necrosis hemorrágica.3. Ingestión. Rara vez los microorganismos son ingeridos en carne infectada, con ella resultante invasión y ulceración de la mucosa gastrointestinal.
tarea # 6
FROTIS
Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.
REALIZACIÓN DEL FROTIS
Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Es necesaria muy poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que en el extremo curvo de su filamento queda retenida una mínima gota de agua, que resulta suficiente.
Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones asépticas, una pequeña cantidad del cultivo bacteriano en medio sólido y transferirlo a la gota de agua. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensión homogénea que quede bastante extendida para facilitar su secado.Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con colocar y extender una gota de la suspensión bacteriana, que se toma con el asa de siembra, directamente sobre el portaobjetos.
Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercando el porta a la llama del mechero. En este caso hay que tener mucha precaución de no calentar demasiado el porta pues las células pueden deformarse o romperse.
FIJACIÓN DE LAS BACTERIAS AL PORTAOBJETOS
Por calor: Pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar el porta entre los pases.
Con metanol (para bacterias procedentes de medio líquido). Añadir unas gotas de metanol sobre la extensión completamente seca. Golpear el portaobjetos por su canto con cuidado contra la mesa de trabajo para retirar de inmediato el exceso de metanol. Esperar a que el metanol se evapore completamente.
Una vez realizado el frotis y fijadas las bacterias, las preparaciones pueden ser observadas al microscopio, aunque carecen de contraste. Lo normal es continuar con el proceso de tinción.
TINCIÓN DEL FROTIS BACTERIANO
Cubrir el frotis con abundante colorante y dejarlos actuar durante el tiempo que indique el protocolo de cada tinción concreta. Suele oscilar entre 1 y 5 minutos. En ocasiones el colorante tiñe sólo en caliente, por lo que el tiempo que dure su actuación se deberá sostener el portaobjetos con unas pinzas sobre la llama del mechero para que humee el colorante, pero teniendo mucho cuidado de que no llegue a hervir ya que se produciría la destrucción de las células.
Lavar la preparación con agua para eliminar el colorante. Esta operación se realiza inclinando el portaobjetos y aplicando el chorro de agua en su parte superior de manera que resbale sobre el frotis, pero sin que vaya dirigido directamente sobre él, pues podría arrastrar parte del frotis consigo. Eliminar la máxima cantidad de agua de los portaobjetos golpeándolos por su canto con cuidado contra la superficie de la mesa de trabajo.
Secar el porta presionando entre dos papeles de filtro, pero en ningún caso se debe frotar el porta.
Observar la preparación al microscopio llegando hasta el máximo aumento. Si se quiere montar de forma definitiva no se debe usar ahora el aceite de inmersión.
MONTAJE DEFINITIVO DE LA PREPARACIÓN
La técnica siguiente es de aplicación para cualquier preparación microscópica que se desee montar de forma definitiva. Se anotará en un extremo del portaobjetos el contenido de la preparación, la fecha y, en su caso, el nombre del alumno.
Pasar sucesivamente los portaobjetos por las siguientes soluciones manteniéndolos un mínimo de 5 minutos en cada baño. La serie de alcoholes puede modificarse en función de la disponibilidad de los reactivos, pero el objetivo es que la preparación quede totalmente deshidratada. Escurrir bien el reactivo antes de introducirlo en el siguiente baño.
Alcohol de 70º
Alcohol de 95º
Acetona pura
Acetona-xilol (1:1)
Xilol
Montar la preparación. Emplear bálsamo de Canadá, euparal o algún medio de montaje sintético. Utilizar preferiblemente cubreobjetos de 22x22 mm.
BIBLIOGRAFIA
http://www.joseacortes.com/practicas/frotisbact.htm
Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.
REALIZACIÓN DEL FROTIS
Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Es necesaria muy poca cantidad de agua, por lo que se puede usar el asa de siembra, ya que en el extremo curvo de su filamento queda retenida una mínima gota de agua, que resulta suficiente.
Flamear el asa de siembra, tomar, en condiciones asépticas, una pequeña cantidad del cultivo bacteriano en medio sólido y transferirlo a la gota de agua. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensión homogénea que quede bastante extendida para facilitar su secado.Si la muestra se toma de un cultivo en medio líquido, no es necesario realizar los dos primeros pasos ya que basta con colocar y extender una gota de la suspensión bacteriana, que se toma con el asa de siembra, directamente sobre el portaobjetos.
Esperar hasta que el líquido se evapore o acelerar su evaporación acercando el porta a la llama del mechero. En este caso hay que tener mucha precaución de no calentar demasiado el porta pues las células pueden deformarse o romperse.
FIJACIÓN DE LAS BACTERIAS AL PORTAOBJETOS
Por calor: Pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar el porta entre los pases.
Con metanol (para bacterias procedentes de medio líquido). Añadir unas gotas de metanol sobre la extensión completamente seca. Golpear el portaobjetos por su canto con cuidado contra la mesa de trabajo para retirar de inmediato el exceso de metanol. Esperar a que el metanol se evapore completamente.
Una vez realizado el frotis y fijadas las bacterias, las preparaciones pueden ser observadas al microscopio, aunque carecen de contraste. Lo normal es continuar con el proceso de tinción.
TINCIÓN DEL FROTIS BACTERIANO
Cubrir el frotis con abundante colorante y dejarlos actuar durante el tiempo que indique el protocolo de cada tinción concreta. Suele oscilar entre 1 y 5 minutos. En ocasiones el colorante tiñe sólo en caliente, por lo que el tiempo que dure su actuación se deberá sostener el portaobjetos con unas pinzas sobre la llama del mechero para que humee el colorante, pero teniendo mucho cuidado de que no llegue a hervir ya que se produciría la destrucción de las células.
Lavar la preparación con agua para eliminar el colorante. Esta operación se realiza inclinando el portaobjetos y aplicando el chorro de agua en su parte superior de manera que resbale sobre el frotis, pero sin que vaya dirigido directamente sobre él, pues podría arrastrar parte del frotis consigo. Eliminar la máxima cantidad de agua de los portaobjetos golpeándolos por su canto con cuidado contra la superficie de la mesa de trabajo.
Secar el porta presionando entre dos papeles de filtro, pero en ningún caso se debe frotar el porta.
Observar la preparación al microscopio llegando hasta el máximo aumento. Si se quiere montar de forma definitiva no se debe usar ahora el aceite de inmersión.
MONTAJE DEFINITIVO DE LA PREPARACIÓN
La técnica siguiente es de aplicación para cualquier preparación microscópica que se desee montar de forma definitiva. Se anotará en un extremo del portaobjetos el contenido de la preparación, la fecha y, en su caso, el nombre del alumno.
Pasar sucesivamente los portaobjetos por las siguientes soluciones manteniéndolos un mínimo de 5 minutos en cada baño. La serie de alcoholes puede modificarse en función de la disponibilidad de los reactivos, pero el objetivo es que la preparación quede totalmente deshidratada. Escurrir bien el reactivo antes de introducirlo en el siguiente baño.
Alcohol de 70º
Alcohol de 95º
Acetona pura
Acetona-xilol (1:1)
Xilol
Montar la preparación. Emplear bálsamo de Canadá, euparal o algún medio de montaje sintético. Utilizar preferiblemente cubreobjetos de 22x22 mm.
BIBLIOGRAFIA
http://www.joseacortes.com/practicas/frotisbact.htm
clase #5
practica #2
TECNICA DE ESTERILIZACION
INVESTIGAR LA TECNICA DE ESTERILIZACION CON CALOS HUMEDO EN AUTOCLAVE.
SE HACE INCAPIE QUE LOS ALUMNOS DEBEN CONOCER ADECUADAMENE ESTE TIPO DE TECNIA YA QUE AL REALIZAR TIENE MUCHO RIESGO QUE PUEDE OCACIONAR UN ACCIDENTE.SE DEBE TENER LISTA DEDES EL PRINCIPIO DE LA PRACTICA PARA AHORRAR Y AGILIZAR EL TIEMPO.DEBEMOS TENERLA LISTA HIGIENICAMENTE CON SU AGUA DESTILADA HASTA EL RAS DE LA PARRILLA Y SEGUIR LA SINDICACIONES DE L ATECNICA DE ESTERILIZACION.
practica #3
SIEMBRA EN CAJAS PETRI EN FORMA DE ESTRIAS.
MATERIALES:
1.- cajas petri con medios de cultivo ya elaborado.
2.-muestras de desecho como: saliba muestras dentales,raspado de piel,orina,agua de verduras,agua fresca,muestra de snagre.
3.-aza bacteriologica
4.-mechero de buncen.
5.-vaso de precipitado con 25 ml de agua
7.-papel para vestir mesa.
8.-papel secante.
8.- torunda de algodon.
9.-maskigntape cafe.
DESARROLLO
SE REALIZA LA TOMA DE UNA MUESTRA DE DESECHO PARA SIEMBRA EN FORMA DE ESTRIA EN CAJA PETRI DE LA SIGUIENTE MANERA, CON LA AZA BACTERIOLOGICA
TOMAMOS UNA PEQUEÑAS MUESTRA DE DESECHO Y SIEMBRAMOS EN FORMA ESTRIADA EN CAJA PETRI.
EL AZA BACTERIOLOGICA SE PARA POR EL MECHERO PARA ESTERILIZARLA Y ENVOLVER A REALIZAR EL MISMO PROCESO CON OTRA MUESTRA DE DESECHO.
UNA VES SEMBRADA LAS CAJAS PETRI SE SIERRAN SE ETIQUETAN APLICANDO LOS DATOS DE LA MUESTRA Y EL TIPO DE ESTRIA SEMBRADA.ES IMPORTANTE REALIZAR LAS SIEMBRA EN CAJA PETRI CON VARILLA DE CRISTAL ALA CUAL LE DAMOS EL NOMBRE DE SIEMBRA POR DISPERSION.
UNA VEZ ETIQUETADOS LAS CAJAS PETRI SE ENTREGAN LAS CAJAS AL ENCARGADO DEL LABORATORIO PARA QUE SE DE ENTRADA AL PROCESO DE INCUBACION A 37°C DURANTE 24, 48 Y 72 HRS.
NOTA: en el proceso de siembra de liquido plasmatico se requiere el siguiente material:
-TUBO CON TAPON ROJO
-JERINGA DE 5ML
-TORNIQUETE
-TORUNFAS DE ALGODON CON ALCOHOL
-CENTRIFUGA
-TUBO DE ENSAYE VACIO
DESARROLLO
Técnica de esterilización
Se realiza asexia y antisexia del pliegue del brazo para poder tener la zona limpia. Este proceso antiséptico se lleva acabo de arriba abajo solamente una vez que tiene la zona limpia se acude a la extracción de sangre fresca del pliegue del brazo conducto sanguíneo realizando la ven función con la jeringa presentada de forma acostada. La jeringa tiene una aguja con punta cortante lo que nos que nos da la facilidad de que esta no da de entrar por el conducto sanguíneo.
La jeringa se toma para verificar y asegurar del embudo jalando hacia afuera introducción así mismo asegurando la jeringa una vez que esté listo el paciente con mucha seguridad jalamos el embudo para poder extraer el liquido sanguíneo (tejido conectivo) ya teniendo nuestra sangre en la jeringa la trasladamos e introducimos en el tubo de ensaye con tapón rojo y se realiza automáticamente en el tubo el cual no tiene anticoagulante.
Una vez tomada la sangre se le da el tiempo necesario reloj en mano para verificar el tiempo de coagulación para que el alumno anote de 1 a 8 minutos tiempos normales pero va a coagular de 7 o 2.
Los tubos que contiene la sangre se van a centrifugar a 1500 revoluciones minutos donde va a ver un proceso de separación por precipitado y es centrifugado durante 5 minutos encontramos con separación con paquete sanguíneo y plasma.
Se separan utilizando el tubo de ensayo la norma 087 y el plasma de utiliza para realizar la siembra.
NOTA: toda esta técnica también se llevara a cabo en la practica 8 en pruebas se aglutinación.
PRACTICA# 4
OBSERVACION MACROSCOPICA
El alumno realiza observación macroscópica de la caja petri anteriormente sembradas en las que se presenta desarrollo o crecimiento de colonias bacterianas.
MATERIALES:
1.- cajas petri con medio de cultivo
2.-aza bacteriológica
3.-2 mecheros d bunsen
4.-vaso de precipitado con 25ml de agua destilada
5.-3 torundas de algodón secas
6.- 3 torundas de algodón alcoholizadas
DESARROLLO
Cajas petri ya sembradas son depositadas en el campo que se realiza con los 2 mecheros en la parte media de la mesa.
Una vez pierden en el campo de esterilización se observan los crecimientos dé las cajas petri se registra los observado se abre la caja petri se registra el olor que despido el color que presente y se registra con gráficos dibujos y fotografías.
PRACTICA#5
ELABORACION DE UN FROTIS
El alumno debe realizar un frotis con el producto obtenido en las cajas petri el cual debe ser fino y delgado para poder realizar un proceso de difusión.
TEMA DE INVESTIGACION (frotis)
MATERIALES:
1.-caja petri con medio de cultivo
2.-aza bacteriológica
3.-vaso de precipitado con agua destilada 25ml.
4.- mechero de bunsen
5.- papel secante
DESARROLLO
Se toma un porta objetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material en la caja petri”bacteriológico”.
Con el aza bacteriológica base de platino se va a realizar un barrido en el porta objetos en su parte central esterilizando primero el aza bacteriológica en la flama del mechero dejándolo hasta el rojo vivo se retira se introduce a la caja petri las colonia desarrolladas se toma una pequeña muestra de lo que se desarrolla y se deposita en el porta objetos donde el pequeño movimiento de izquierda a derecha para extender el producto obtenido.
Si el frotis se encuentra grueso se vuelve a tomar una gota de agua se deposita en el porta objetos sobre el producto anteriormente depositado y realiza nuevamente la maniobra y así sucesivamente hasta que quede grande y delgado. Una vez terminado el proceso del barrido realizamos una maniobra sobre la flama a este le denominamos fijación de frotis con calor seco a fuego directo. Una vez fijado el frotis quede listo para el proceso de tinción de gran.
TINCION DE GRAM
Se debe realizar una tinción de gran en el frotis anteriormente para poder llegar a la observación microscópica de los microorganismos denominados baterías determinados en forma de esfera bastones y espirales cabe mencionar que en este elemento de información no podamos llegar a señalar microscópicamente las espirales.
METRIALES:
Tinción de gran
Caja de copri
Porta objetos con froti
Algodón seco
Papel secante mechero aceite de inmersión
Microscopio
DESARROLLO
Realizamos el proceso de tinción utilizando la tinción de gran que anteriormente a la investigación para aplicar la técnica correspondiente en la tinción la que basa en tiempo. Una vez teñido la lámina de cristal verificamos que no se queme con la pintura por lo que no sirve el frotis y como resulta debemos elaborar un nuevo frotis.
Si la laminilla en su tecno está bien teñida acudimos al aplicarle una gota de aceite de inmersión la montamos en la platina del microscopio asegurada realizamos el enfoque en 100x para que nuestra observación microscópica de resultado de poder visualizar las bacterias de forma esférica y de forma de bastón ambas de pueden encontrar en una sola pieza 3 y 4 piezas en cadena largas y agrupadas hasta en 3er plano estas esferas se les denomina cocos así mismo los bastones.
INVESTIGAR COCOS Y BACILOS (GRAFICOS)
NOTA: una vez firmado las actividades Ya dadas se suban al blog.
TECNICA DE ESTERILIZACION
INVESTIGAR LA TECNICA DE ESTERILIZACION CON CALOS HUMEDO EN AUTOCLAVE.
SE HACE INCAPIE QUE LOS ALUMNOS DEBEN CONOCER ADECUADAMENE ESTE TIPO DE TECNIA YA QUE AL REALIZAR TIENE MUCHO RIESGO QUE PUEDE OCACIONAR UN ACCIDENTE.SE DEBE TENER LISTA DEDES EL PRINCIPIO DE LA PRACTICA PARA AHORRAR Y AGILIZAR EL TIEMPO.DEBEMOS TENERLA LISTA HIGIENICAMENTE CON SU AGUA DESTILADA HASTA EL RAS DE LA PARRILLA Y SEGUIR LA SINDICACIONES DE L ATECNICA DE ESTERILIZACION.
practica #3
SIEMBRA EN CAJAS PETRI EN FORMA DE ESTRIAS.
MATERIALES:
1.- cajas petri con medios de cultivo ya elaborado.
2.-muestras de desecho como: saliba muestras dentales,raspado de piel,orina,agua de verduras,agua fresca,muestra de snagre.
3.-aza bacteriologica
4.-mechero de buncen.
5.-vaso de precipitado con 25 ml de agua
7.-papel para vestir mesa.
8.-papel secante.
8.- torunda de algodon.
9.-maskigntape cafe.
DESARROLLO
SE REALIZA LA TOMA DE UNA MUESTRA DE DESECHO PARA SIEMBRA EN FORMA DE ESTRIA EN CAJA PETRI DE LA SIGUIENTE MANERA, CON LA AZA BACTERIOLOGICA
TOMAMOS UNA PEQUEÑAS MUESTRA DE DESECHO Y SIEMBRAMOS EN FORMA ESTRIADA EN CAJA PETRI.
EL AZA BACTERIOLOGICA SE PARA POR EL MECHERO PARA ESTERILIZARLA Y ENVOLVER A REALIZAR EL MISMO PROCESO CON OTRA MUESTRA DE DESECHO.
UNA VES SEMBRADA LAS CAJAS PETRI SE SIERRAN SE ETIQUETAN APLICANDO LOS DATOS DE LA MUESTRA Y EL TIPO DE ESTRIA SEMBRADA.ES IMPORTANTE REALIZAR LAS SIEMBRA EN CAJA PETRI CON VARILLA DE CRISTAL ALA CUAL LE DAMOS EL NOMBRE DE SIEMBRA POR DISPERSION.
UNA VEZ ETIQUETADOS LAS CAJAS PETRI SE ENTREGAN LAS CAJAS AL ENCARGADO DEL LABORATORIO PARA QUE SE DE ENTRADA AL PROCESO DE INCUBACION A 37°C DURANTE 24, 48 Y 72 HRS.
NOTA: en el proceso de siembra de liquido plasmatico se requiere el siguiente material:
-TUBO CON TAPON ROJO
-JERINGA DE 5ML
-TORNIQUETE
-TORUNFAS DE ALGODON CON ALCOHOL
-CENTRIFUGA
-TUBO DE ENSAYE VACIO
DESARROLLO
Técnica de esterilización
Se realiza asexia y antisexia del pliegue del brazo para poder tener la zona limpia. Este proceso antiséptico se lleva acabo de arriba abajo solamente una vez que tiene la zona limpia se acude a la extracción de sangre fresca del pliegue del brazo conducto sanguíneo realizando la ven función con la jeringa presentada de forma acostada. La jeringa tiene una aguja con punta cortante lo que nos que nos da la facilidad de que esta no da de entrar por el conducto sanguíneo.
La jeringa se toma para verificar y asegurar del embudo jalando hacia afuera introducción así mismo asegurando la jeringa una vez que esté listo el paciente con mucha seguridad jalamos el embudo para poder extraer el liquido sanguíneo (tejido conectivo) ya teniendo nuestra sangre en la jeringa la trasladamos e introducimos en el tubo de ensaye con tapón rojo y se realiza automáticamente en el tubo el cual no tiene anticoagulante.
Una vez tomada la sangre se le da el tiempo necesario reloj en mano para verificar el tiempo de coagulación para que el alumno anote de 1 a 8 minutos tiempos normales pero va a coagular de 7 o 2.
Los tubos que contiene la sangre se van a centrifugar a 1500 revoluciones minutos donde va a ver un proceso de separación por precipitado y es centrifugado durante 5 minutos encontramos con separación con paquete sanguíneo y plasma.
Se separan utilizando el tubo de ensayo la norma 087 y el plasma de utiliza para realizar la siembra.
NOTA: toda esta técnica también se llevara a cabo en la practica 8 en pruebas se aglutinación.
PRACTICA# 4
OBSERVACION MACROSCOPICA
El alumno realiza observación macroscópica de la caja petri anteriormente sembradas en las que se presenta desarrollo o crecimiento de colonias bacterianas.
MATERIALES:
1.- cajas petri con medio de cultivo
2.-aza bacteriológica
3.-2 mecheros d bunsen
4.-vaso de precipitado con 25ml de agua destilada
5.-3 torundas de algodón secas
6.- 3 torundas de algodón alcoholizadas
DESARROLLO
Cajas petri ya sembradas son depositadas en el campo que se realiza con los 2 mecheros en la parte media de la mesa.
Una vez pierden en el campo de esterilización se observan los crecimientos dé las cajas petri se registra los observado se abre la caja petri se registra el olor que despido el color que presente y se registra con gráficos dibujos y fotografías.
PRACTICA#5
ELABORACION DE UN FROTIS
El alumno debe realizar un frotis con el producto obtenido en las cajas petri el cual debe ser fino y delgado para poder realizar un proceso de difusión.
TEMA DE INVESTIGACION (frotis)
MATERIALES:
1.-caja petri con medio de cultivo
2.-aza bacteriológica
3.-vaso de precipitado con agua destilada 25ml.
4.- mechero de bunsen
5.- papel secante
DESARROLLO
Se toma un porta objetos limpio para poder realizar en su superficie un frotis fresco con el material en la caja petri”bacteriológico”.
Con el aza bacteriológica base de platino se va a realizar un barrido en el porta objetos en su parte central esterilizando primero el aza bacteriológica en la flama del mechero dejándolo hasta el rojo vivo se retira se introduce a la caja petri las colonia desarrolladas se toma una pequeña muestra de lo que se desarrolla y se deposita en el porta objetos donde el pequeño movimiento de izquierda a derecha para extender el producto obtenido.
Si el frotis se encuentra grueso se vuelve a tomar una gota de agua se deposita en el porta objetos sobre el producto anteriormente depositado y realiza nuevamente la maniobra y así sucesivamente hasta que quede grande y delgado. Una vez terminado el proceso del barrido realizamos una maniobra sobre la flama a este le denominamos fijación de frotis con calor seco a fuego directo. Una vez fijado el frotis quede listo para el proceso de tinción de gran.
TINCION DE GRAM
Se debe realizar una tinción de gran en el frotis anteriormente para poder llegar a la observación microscópica de los microorganismos denominados baterías determinados en forma de esfera bastones y espirales cabe mencionar que en este elemento de información no podamos llegar a señalar microscópicamente las espirales.
METRIALES:
Tinción de gran
Caja de copri
Porta objetos con froti
Algodón seco
Papel secante mechero aceite de inmersión
Microscopio
DESARROLLO
Realizamos el proceso de tinción utilizando la tinción de gran que anteriormente a la investigación para aplicar la técnica correspondiente en la tinción la que basa en tiempo. Una vez teñido la lámina de cristal verificamos que no se queme con la pintura por lo que no sirve el frotis y como resulta debemos elaborar un nuevo frotis.
Si la laminilla en su tecno está bien teñida acudimos al aplicarle una gota de aceite de inmersión la montamos en la platina del microscopio asegurada realizamos el enfoque en 100x para que nuestra observación microscópica de resultado de poder visualizar las bacterias de forma esférica y de forma de bastón ambas de pueden encontrar en una sola pieza 3 y 4 piezas en cadena largas y agrupadas hasta en 3er plano estas esferas se les denomina cocos así mismo los bastones.
INVESTIGAR COCOS Y BACILOS (GRAFICOS)
NOTA: una vez firmado las actividades Ya dadas se suban al blog.
miércoles, 20 de mayo de 2009
clase# 4
operara equipo y material de laboratorio
medio de cultivo
practica#1
objetivo
introduccion
indice
en esta practica que se va a realizar se toma en cuenta las 3 etapas que se refieren a analitica,preanalitica y potsanalitica las cuales se deben compaginar con la practica secuencial.
INTRUCCIONES:
1.- el alumno de los analisis clinicos debe estar puntual con su equipo de bioseguridad en el laboratorio.
2.- solicitar vale de material para que se habiliten todos los materiales a utilizar en la practica en medios de cultivo.
3.- una vez estando dentro del laboratorio de forma muy primordial los integrantes de la mesa de trabajar deberan habilitar el equipo de esterilizacion "auntoclave".el cual se debe cargar con agua destilada. estudiar para la esterilizacion.
4.- vestir mesa de laboratorio con papael blanco.
5.-habilitar linea de gas L.P. cualquiera de los integrantes debe saber la linea de gas para el mantenimiento de gas, verificando que loas valvulas principales de cada mesa de las cuales se encuentra debajo de la misma.
DESARROLLO DE LA PRACTICA
*para realizar un medio de cultivo requerimos un equipo de material de cristaleria d apoyo ,quimicos,cientificos.
CRISTALERIA
*Matraz elenmeyer 250 ml.
*vaso de precipitado 250ml.
*vaso de precipitado 50ml.
*varilla de cristal(AGITADOR).
*Vidrio de reloj.
*cajas petrix.
*espatula.
*balanza granataria.
*cinta maskingtape cafe.
*embudo de cristal.
*turundas de algodon.
*papael secante.
*medio de cultivo en polvo 450gr.
*papel ,lapiz,.
*agua destilzada.
-rehidratamos de acuerd a las indicaciones que estan presentes en la estiqueta de medio de cultvo la cantidad necesaria de polvco reactivo para elaboracion de 5 a 7 caja petrix en las que se utilizan tambien agua destilada.
para poder rehidratar el polvo de medio de cultivo necesitamos manejar de 3.
pasamos el medio de cultivo en polvo que vallamos a utilizar y pesra en el vidrio de reloj.
una vez pesado el polvo se mezcla con agua el deshidratada de 5 a 7 cajas.
para poder mezclar utilizaremos el matraz elenmeyer para la mezcla agitando con la varilla de cristal para que no queden rumos.
una vez terminado este proceso dejamosreposar que nos marque la etiqueta.
en este espacio de tiempo todo el equipo concenza de desarrollo la cual lleva graficos, fotos, pequeños videos y asi le damos tiempo al proceso de elaboracion.
una vez reposado el producto se tieneya listo los mecheros de bonce para poder realizar el proceso de ebullicion al cual se le daba 1 minuto de tiempo desde que este empieza a iniciar se realiza en pequeño muñequeo por la flama azul de mechero siendo muy cuidadoso contiene, ya pued ocacionar quemaduras hasta de 2do grado , retira cuidadosamente una y otra vez tomando el tiempo hasta que se cumpla el minuto.
ya estando frio el medio de cultivo tamponeamos con algodon sellando con una cinta maskigntape asegurando la puntilla del matraz etiquetamos con un numero de mesa que el medio de cultivo y ademas la hora y la fecha.
los encargados del porceso de la esterilizacion son solicitados a las mesas , los medios de cultivo para ingresar a la auntoclave.
dos de los encragados cerraran los equipos verificando que no haya riesgo, deben utilizar guantes.
una vez tomando el proceso de esterilizacion se retira el porceso del medio de culivo de auntoclave, se pone en los mecheros.
llenado cajas petri.las cajas petri deben estar dentro de los campos de esterilizacion de la mesa no fuera de el para realizar el llenado de medio de cultivo y este nose contamina.con el vaso de precipitado de 50ml organizaremos las act. de vaciado pero antes esterilizaremos las boquillas del vasito.una vez que ya se realizo la extraccion vaciaremos la cantidad necesaria para la caja llenada.ya vaciado el material en la caja petri esta se deja semitapada no en su totalidad para que no exista vapor de agua.ya estando solicitado el medio de cultivo se tapa se etiqueta y se asegura con maskingtape para etiquetar con los siguientes datos.
medio de cultivo
practica#1
objetivo
introduccion
indice
en esta practica que se va a realizar se toma en cuenta las 3 etapas que se refieren a analitica,preanalitica y potsanalitica las cuales se deben compaginar con la practica secuencial.
INTRUCCIONES:
1.- el alumno de los analisis clinicos debe estar puntual con su equipo de bioseguridad en el laboratorio.
2.- solicitar vale de material para que se habiliten todos los materiales a utilizar en la practica en medios de cultivo.
3.- una vez estando dentro del laboratorio de forma muy primordial los integrantes de la mesa de trabajar deberan habilitar el equipo de esterilizacion "auntoclave".el cual se debe cargar con agua destilada. estudiar para la esterilizacion.
4.- vestir mesa de laboratorio con papael blanco.
5.-habilitar linea de gas L.P. cualquiera de los integrantes debe saber la linea de gas para el mantenimiento de gas, verificando que loas valvulas principales de cada mesa de las cuales se encuentra debajo de la misma.
DESARROLLO DE LA PRACTICA
*para realizar un medio de cultivo requerimos un equipo de material de cristaleria d apoyo ,quimicos,cientificos.
CRISTALERIA
*Matraz elenmeyer 250 ml.
*vaso de precipitado 250ml.
*vaso de precipitado 50ml.
*varilla de cristal(AGITADOR).
*Vidrio de reloj.
*cajas petrix.
*espatula.
*balanza granataria.
*cinta maskingtape cafe.
*embudo de cristal.
*turundas de algodon.
*papael secante.
*medio de cultivo en polvo 450gr.
*papel ,lapiz,.
*agua destilzada.
-rehidratamos de acuerd a las indicaciones que estan presentes en la estiqueta de medio de cultvo la cantidad necesaria de polvco reactivo para elaboracion de 5 a 7 caja petrix en las que se utilizan tambien agua destilada.
para poder rehidratar el polvo de medio de cultivo necesitamos manejar de 3.
pasamos el medio de cultivo en polvo que vallamos a utilizar y pesra en el vidrio de reloj.
una vez pesado el polvo se mezcla con agua el deshidratada de 5 a 7 cajas.
para poder mezclar utilizaremos el matraz elenmeyer para la mezcla agitando con la varilla de cristal para que no queden rumos.
una vez terminado este proceso dejamosreposar que nos marque la etiqueta.
en este espacio de tiempo todo el equipo concenza de desarrollo la cual lleva graficos, fotos, pequeños videos y asi le damos tiempo al proceso de elaboracion.
una vez reposado el producto se tieneya listo los mecheros de bonce para poder realizar el proceso de ebullicion al cual se le daba 1 minuto de tiempo desde que este empieza a iniciar se realiza en pequeño muñequeo por la flama azul de mechero siendo muy cuidadoso contiene, ya pued ocacionar quemaduras hasta de 2do grado , retira cuidadosamente una y otra vez tomando el tiempo hasta que se cumpla el minuto.
ya estando frio el medio de cultivo tamponeamos con algodon sellando con una cinta maskigntape asegurando la puntilla del matraz etiquetamos con un numero de mesa que el medio de cultivo y ademas la hora y la fecha.
los encargados del porceso de la esterilizacion son solicitados a las mesas , los medios de cultivo para ingresar a la auntoclave.
dos de los encragados cerraran los equipos verificando que no haya riesgo, deben utilizar guantes.
una vez tomando el proceso de esterilizacion se retira el porceso del medio de culivo de auntoclave, se pone en los mecheros.
llenado cajas petri.las cajas petri deben estar dentro de los campos de esterilizacion de la mesa no fuera de el para realizar el llenado de medio de cultivo y este nose contamina.con el vaso de precipitado de 50ml organizaremos las act. de vaciado pero antes esterilizaremos las boquillas del vasito.una vez que ya se realizo la extraccion vaciaremos la cantidad necesaria para la caja llenada.ya vaciado el material en la caja petri esta se deja semitapada no en su totalidad para que no exista vapor de agua.ya estando solicitado el medio de cultivo se tapa se etiqueta y se asegura con maskingtape para etiquetar con los siguientes datos.
nombre del medio de cultivo
fecha
mesa
hora.
si el medio de cultivo se contamina en 24,48 y 72 hrs tendra que volver a realizar la practica y sancion.
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